細(xì)胞融合儀相比普通融合方法有哪些優(yōu)勢(shì)?
點(diǎn)擊次數(shù):1724 更新時(shí)間:2019-09-10
細(xì)胞融合儀比較適合用在細(xì)胞雜交、細(xì)胞融合、可在倒置顯微鏡下直接觀察,可以用在微生物學(xué)、動(dòng)物醫(yī)學(xué)、生物工程等方面的研究。與普通的化學(xué)融合方法比起來,它使用的時(shí)候?qū)?xì)胞沒有毒性、有較高的融合效率、更加的方便快速等特點(diǎn)都是比較明顯的??蛇x購各種平型電極和針型電極。
當(dāng)細(xì)胞置于非常高的電場(chǎng)中,細(xì)胞膜就變得具有通透性,能讓外界的分子擴(kuò)散進(jìn)細(xì)胞內(nèi),這一現(xiàn)象稱為電穿孔。運(yùn)用這一技術(shù),許多物質(zhì),包括dna、rna、蛋白質(zhì)、藥物、抗體和熒光探針都能載入細(xì)胞。作為一種基因轉(zhuǎn)導(dǎo)方法,電穿孔已被廣泛用于各種細(xì)胞類型,包括細(xì)菌、酵母、植物和動(dòng)物細(xì)胞;而且,它還能作為注射方法(稱為電注射),把各種外源物質(zhì)引入活細(xì)胞。與其他常用的導(dǎo)入外源物質(zhì)的方法相比,電穿孔具有很多優(yōu)點(diǎn)。首先,不必象顯微注射那樣使用玻璃針,不需要技術(shù)培訓(xùn)和昂貴的設(shè)備,可以一次對(duì)成百萬的細(xì)胞進(jìn)行注射。第二,與用化學(xué)物質(zhì)相比,電穿孔幾乎沒有生物或化學(xué)副作用。第三,因?yàn)殡姶┛资且环N物理方法,較少依賴細(xì)胞類型,因而應(yīng)用廣泛。實(shí)際上,對(duì)大多數(shù)細(xì)胞類型,用電穿孔法基因的轉(zhuǎn)移效率比化學(xué)方法高得多。
除了能使細(xì)胞膜具有通透性,讓外界的分子擴(kuò)散入胞液中以外,高強(qiáng)度的電場(chǎng)脈沖也能引起細(xì)胞融合,這一現(xiàn)象叫做電融合。然而,在用電脈沖融合前必須使細(xì)胞相互緊密接觸,這一電融合方法在原生質(zhì)融合制取雜交植物,胚胎細(xì)胞相互融合制備動(dòng)物克隆方面非常有用,尤其在制取雜交瘤細(xì)胞制備單克隆抗體方面用處很大。幾個(gè)實(shí)驗(yàn)室已證明使用電場(chǎng)電融合效率比常規(guī)的化學(xué)融合方法高10到100倍,近,貼壁細(xì)胞的電融合還被用來研究細(xì)胞融合時(shí)細(xì)胞的骨架成分和細(xì)胞器的動(dòng)力學(xué)重排。